Roche-不含EDTA的cOmplete™蛋白酶抑制剂混合物

cOmplete, EDTA-free

Figure 1: His-tagged hAkt1 protein purified and analyzed using SDS-PAGE followed by Coomassie Blue staining.

Inhibition of different proteases by cOmplete Protease Inhibitor Tablets.

一般描述

不含EDTA的cOmplete蛋白酶抑制剂片剂可抑制广泛的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶。与其他cOmplete片剂相比，它们不含EDTA - 不含其他螯合 剂, 例如 EGTA - 保持金属依赖性蛋白质的稳定性和功能不受影响。利用IMAC（固相金属亲和色谱）进行的多聚His标签融合蛋白亲和纯化也得到了简化（无需透析）。
由于优化了片剂的成分，它们对丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶具有出色的抑制作用，并且非常适合保护从动物组织、植物、酵母和细菌中分离的蛋白质。不含EDTA的cOmplete片剂同时含有不可逆和可逆的蛋白酶抑制剂。金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶不受抑制。

不含EDTA的cOmplete片剂与cOmplete片剂相同，唯一的区别是不包含EDTA或其他螯合剂（例如 EGTA）。

特异性

几种蛋白酶抑制剂的混合物。用于抑制丝氨酸、半胱氨酸，但不用于抑制金属蛋白酶。

应用

cOmplete^™，不含EDTA，能有效抑制细菌、酵母、植物和动物细胞提取物中的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶。金属及天冬氨酸蛋白酶不受抑制。
不含EDTA的cOmplete片剂用于抑制大体积（高达50ml）的蛋白水解活性，其中EDTA可能干扰蛋白质稳定性（例如，含金属的蛋白质）或随后的检测。由于EDTA会对IMAC（固相金属亲和色谱）产生干扰，不含EDTA的cOmplete更适合多聚His标签融合蛋白的分离过程。
如需在更小的体积（最高达10ml）内对蛋白酶活性进行抑制，我们推荐使用不含EDTA的cOmplete Mini。

不含EDTA的cOmplete片剂可按片/50 ml孵育液进行添加。用罗氏通用蛋白酶底物（酪蛋白、试卤灵标记的）测定蛋白水解活性。需要在酸性pH范围内提取或单步分离时，只需加入胃蛋白酶抑制剂和不含EDTA的cOmplete片剂，即可确保抑制天冬氨酸（酸性）蛋白酶。所有实验均在+15至+ 25℃下进行。

不含EDTA的cOplete^™蛋白酶抑制剂混合物已被用作以下试剂的组分

• 裂解转染人胚肾（HEK293T）细胞的裂解缓冲液，以及用于斑马鱼胚胎均质的放射免疫沉淀测定体系(RIPA)裂解缓冲液
• 用于海马组织均质的组织蛋白提取试剂(T-PER)
• 用于肝细胞裂解的十二烷基硫酸钠 (SDS)裂解缓冲液

特点和优势

使用cOmplete蛋白酶抑制剂片剂可以保护蛋白质免于被广泛的蛋白酶降解。在短短几分钟内，不受抑制的蛋白酶水解活性即可降解您花费数天分离的蛋白质。这些方便的水溶性片剂中各自含有蛋白酶抑制剂的混合物，能抑制大多数细胞类型（包括动物、植物、酵母和细菌）的蛋白酶水解活性。不需要称重或测量就能确保一致的结果。

• 便捷性：只需将速溶片从简易箔包装推出并加入缓冲液中即可。
• 完善的保护：立即保护您的蛋白质免受广泛的蛋白酶的降解。
• 灵活性：几乎能够保护任何组织或细胞提取物中的蛋白质，包括动物、植物、酵母、细菌或真菌。
• 安全性：选择对您或您周围的人没有任何风险的无毒抑制剂。
• 适用于IMAC纯化：使用cOmplete组氨酸标记纯化树脂，纯化多组氨酸标记的蛋白质。

属性

包装

20个单独箔泡包装的cOmplete蛋白酶抑制剂混合物片剂。

组分

几种具有广泛抑制特异性的蛋白酶抑制剂专有混合物。

质量

用胰腺提取物进行性能测试。

外形

箔泡包装片剂

制备说明

工作浓度：每50 ml提取液加入1片
工作溶液：处理

使用拇指根部（而非指甲）小心的将片剂从箔泡包装中挤出以防止片剂断裂。

工作溶液的制备

一片不含EDTA的cOmplete片剂足够用于50ml提取溶液中的蛋白酶抑制。当蛋白水解活性非常高时，应25ml提取缓冲液使用一片。片剂可以直接加到提取溶液中。也可制备储备溶液（25X浓度）。

制备储备溶液（25X浓度）

将一片不含EDTA的cOmplete片剂溶于2ml蒸馏水或2ml 100mM磷酸盐缓冲液(pH7.0)。
储存条件（工作溶液）：储备溶液可以在2至8℃下储存1至2周，或在-15至-25℃下储存至少12周。

重悬

溶于水性缓冲液，或直接添加到提取溶液中。也可采用2ml水或100mM磷酸盐缓冲液(pH7.0)制备25×储备溶液。储备溶液可在2至8℃下稳定保存1-2周或在-15至-25℃下稳定保存至少12周；在15至25℃下可以在含硫醇的溶液中使用。

储存及稳定性

2至8 °C储存。（也可-15至-25 °C条件下储存）

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

法律信息

cOmplete is a trademark of Roche